1  凱式定氮儀工作原理結(jié)構(gòu)
凱式定氮儀作為一種依照凱式定氮法基礎(chǔ)上所設(shè)計(jì)的儀器，主要運(yùn)用于對(duì)混合物、化合物內(nèi)總氮含量的測(cè)量。能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)于現(xiàn)有所處的催化劑條件下，通過(guò)運(yùn)用液標(biāo)準(zhǔn)完成測(cè)定，通過(guò)計(jì)算酸的消耗量能夠完成樣品內(nèi)的含氮量計(jì)算。由于蛋白質(zhì)的含氮量系數(shù)計(jì)算較為恒定，能夠依照氮含量與換算系數(shù)相乘，可得蛋白質(zhì)總含量，作為該方法定量測(cè)定蛋白質(zhì)比較經(jīng)典。
1.1 消化
（見(jiàn)圖1）作為比較傳統(tǒng)的凱式定氮法消化、蒸餾裝置。通過(guò)在燒瓶?jī)?nèi)混合加入樣品證能夠浸潤(rùn)樣品。并置于燒瓶在經(jīng)過(guò)預(yù)熱至420℃消化單元內(nèi)，直至經(jīng)過(guò)消化處理燒瓶?jī)?nèi)消化液呈現(xiàn)透明澄清藍(lán)綠色，長(zhǎng)達(dá)0.5～1h的繼續(xù)加熱轉(zhuǎn)變樣品內(nèi)存在的有機(jī)氮，直至生成無(wú)機(jī)氮-銨[3]。
1.2 蒸餾
對(duì)于消化液取下放冷，在加入至50mL水內(nèi)，將50mL稱(chēng)取后加入至接收瓶?jī)?nèi)，然后將混合指示劑加入其中。將蒸餾裝置連接好之后將5mL過(guò)溶液加入至消解燒瓶?jī)?nèi)，可以中和成為所需運(yùn)用，之后蒸餾過(guò)程開(kāi)始。轉(zhuǎn)化消化液內(nèi)存在的銨銀形成氮餾出，之后可以被過(guò)量所吸收[4]。
1.3 滴定及計(jì)算
通過(guò)運(yùn)用酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，滴定洗手液直至終點(diǎn)，對(duì)其中存在的氮、蛋白質(zhì)含量計(jì)算公式如下[5]：
式中：氮含量用N表示;滴定試樣所需的標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積用V1表示;滴定空白所需的標(biāo)準(zhǔn)酸溶液用V0表示;對(duì)標(biāo)定時(shí)溶液濃度用c表示;試樣的質(zhì)量用m表示;試樣消化液的總體積用V表示;試樣內(nèi)的消化液蒸餾所需體積用v表示。
通過(guò)計(jì)算之后進(jìn)行不同試樣種類(lèi)，氮含量與對(duì)應(yīng)氮換算所得蛋白質(zhì)系數(shù)相乘，即可得出蛋白質(zhì)含量。